Programa

Biotecnologia Vegetal

Mestrado Bolonha em Engenharia Agronómica

Programa

Teóricas – 2ª feira 11 h às 13 h Anfiteatro A3

Aulas nº 1, 2, 3 Luísa Carvalho
1. Cultura de Tecidos
3.1.Conceitos e aplicações
3.2. Bases experimentais do Laboratório de Cultura de Tecidos
3.2.1. Meios de cultura: composição, preparação e características
3.2.2 Condições físicas do desenvolvimento das culturas
3.3. Tipos de culturas
3.3.1. Culturas de estruturas pré-determinadas
3.3.2. Cultura de estruturas desdiferenciadas
3.3.3. Cultura de células em suspensão
3.4. Propagação de plantas por cultura in vitro
3.4.1. Micropropagação em meio sólido e em BIT (bioreatores de imersão temporária)
3.4.2. Organogénese por desenvolvimento adventício
3.4.3. Embriogénese somática
3.5. Isolamento, cultura e fusão de protoplastos
3.6. Variação somaclonal e identificação de resistências
3.7. Assegurar a sobrevivência de plantas provenientes de cultura de tecidos: aclimatização
3.7.1. Stresse de transferência
3.7.2. Métodos de aclimatização

Aulas nº 4, 5 Leonor Morais
2. Material genético
1.1. Organização
1.2. Métodos de estudo
1.3. Sequenciação de DNA: métodos clássicos e métodos de alto débito
1.4. Expressão génica
3. Regulação da expressão génica. O mecanismo de RNAi e suas aplicações em Biotecnologia

Aula nº 6 – Mariana Mota
4. Métodos de extração de ácidos nucleicos
5. Conceitos gerais de amplificação de DNA (PCR)

Aulas 7 e 8ª Cristina Oliveira
6. Marcadores moleculares
6. 1.Técnicas gerais para obtenção de marcadores. Descrição dos principais marcadores
6.2. Aplicações em agricultura
6.2.1. Identificação varietal
6.2.2. Diversidade fenética e filogenética
6.2.3. Diagnóstico de organismos patogénicos
6.2.4. Seleção assistida por marcadores

Aula nº 9 – 1º Teste Cristina Oliveira

Aula nº 10 Ana Ribeiro
7. Técnica do PCR quantitativo (qPCR) e aplicações

Aulas nº 11, 12 Luísa Brito
8. Clonagem de genes em bactérias
8.1 Etapas envolvidas numa estratégia de clonagem
8.2 Hospedeiros de clonagem
8.3 Vectores de clonagem
8.4 Métodos de transferência de genes em bactérias
8.5 Métodos de selecção e rastreio de recombinantes

Aulas nº 13, 14 Jorge Almeida
9. Métodos de transferência de genes e expressão génica
9.1. Em plantas
9.2. Deteção da expressão génica
9.3. Estudos de casos

3 turmas Práticas 4ª feira 14h 30 min às 17h e 30 min Lab 24, 5ª feira das 8h às 11 h Sala 24 e das 14h e 30m às 17 h 30 min Lab 14
Práticas
Aulas nº 1, 2, 3 - Luísa Carvalho (Relatório)
Preparação de um meio de cultura; Manipulação em condições asséticas; cultura in vitro de embriões de oliveira, germinação de sementes de tomate. Seguimento das culturas estabelecidas. Repicagem de manutenção de plantas micropropagadas de tomate. Repicagem para início de aclimatização.

Aulas nº 4, 5 - Leonor Morais (Bioinformática) - Relatório
Introdução à Bioinformática; Consulta de bases de dados.
Buscas de similaridade: O algoritmo BLAST e parâmetros para avaliar a qualidade dos alinhamentos.
Identificação de sequências semelhantes através do alinhamento múltiplos de sequências de nucleótidos ou de aminoácidos.

Aula nº 6, 7, 8 - Mariana Mota - Relatório
Extração; quantificação, desenho primers e PCR para marcadores e para deteção; géis e análise de resultados.

Aulas nº 9, 10 - Ana Ribeiro - Perguntas
qPCR e análise dos resultados

Aulas nº 11, 12 - Luísa Brito - Perguntas
Utilização do plasmídeo pUC18 na clonagem de um gene heterólogo em Escherichia coli. Avaliação dos resultados.

Aula nº 13 - Cristina Oliveira - 2º teste

Funcionamento da Unidade Curricular

As matérias podem ser apresentadas nas aulas teóricas, 2ª feira no Anfiteatro A3, ou nas aulas teórico-práticas de 4ª e 5ª feira Lab 24 e Lab 18.
Alguns temas têm uma abordagem experimental (Lab 24 e 18 e Bancada de Fluxo laminar; Lab Horticultura).
Os trabalhos laboratoriais são realizados por grupos formados na aula prática com um número máximo de 4 estudantes.
Qualquer alteração será indicada pela(o) respectiva(o) docente.
Certas aulas têm Relatório de Grupo a entregar na aula seguinte ou uma semana após o termo do período experimental.
As aulas práticas tem presença obrigatória para ser admitido a exame final (ver Avaliação).