Transformação mediada por Agrobacterium tumefaciens em eucariotas

8 Outubro 2020, 08:15 Ana Cristina Garcia Pereira Cabral

Introdução: Explicação sobre o processo de transformação mediado pela Agrobacterium tumefaciens em plantas com foco no plasmídeo Ti, e no processo de produção e transferência do T-DNA desde célula bacteriana até ao núcleo da célula vegetal e a consequente formação dos tumores bacterianos. Utilização da técnica ATMT para a transformação de fungos. Fatores que influenciam a eficiência da transformação por ATMT nos fungos; Formas de confirmar que a transformação foi bem-sucedida; Análise por Southern para identificar o tipo e frequência de eventos de integração de T-DNA em transformados; Vantagens, limitações e aplicação de ATMT em fungos;

Realização do protocolo de ATMT em Colletotrichum: Preparação das células de Agrobacterium para a transformação do fungo. Preparação do fungo; Co-cultivo bactéria/fungo e seleção dos fungos transformados.