Sumários
Transformação mediada por Agrobacterium tumefaciens
6 Novembro 2024, 14:00 • Pedro Talhinhas
Introdução: A descoberta e a utilização de Agrobacterium
tumefaciens como ferramenta de transformação genética. Principais
características do plasmídio Ti e mecanismos moleculares de transformação. A
transformação como ferramenta de investigação e de mutagénese.
Análise de expressão génica
18 Outubro 2024, 14:00 • Luísa Cristina dos Mártires Ferreira de Carvalho
Extração de RNA total, análise de integridade (por electroforese em gel de agarose) e quantificação por espectrofotometria. Preparação de cDNA.
Introdução teórica ao PCR digital.
Comparação entre PCR convencional, PCR
quantitativo em tempo real e PCR digital.
Análise de expressão génica
17 Outubro 2024, 14:00 • Luísa Cristina dos Mártires Ferreira de Carvalho
Extração de RNA total, análise de integridade (por electroforese em gel de agarose) e quantificação por espectrofotometria. Preparação de cDNA.
Introdução teórica ao PCR digital.
Comparação entre PCR convencional, PCR
quantitativo em tempo real e PCR digital.
Análise de expressão génica (Teórica)
16 Outubro 2024, 14:00 • Luísa Cristina dos Mártires Ferreira de Carvalho
Amplificação de sequências por PCR quantitativo em tempo real (RTqPCR): Moleculas de ligação ao DNA em cadeia dupla versus sondas TaqMan.
Cálculo de expressão génica a partir de valores obtidos com PCR quantitativo em tempo real: métodos de quantificação.
Visualização e identificação de proteínas: SDS-PAGE e Western Blot
11 Outubro 2024, 14:00 • Luísa Cristina dos Mártires Ferreira de Carvalho
Preparação da amostra.
Preparação de géis de poliacrilamida
para SDS-PAGE.
Preparação da electroforese.
Visualização das proteínas num gel mediante
coloração com Coomassie Brilliant Blue.
Introdução à técnica de immunobloting
(Western Blot): transferência das proteínas de um gel para uma membrana
de nitrocelulose pelo método semi-seco. A técnica tem o objetivo de posterior
identificação de um polipéptido de interesse. Papel do anticorpo primário e
secundário na deteção do polipéptido de interesse.