Sumários

O metabolismo secundário das plantas importância para a biotecnologia. Aspetos práticos

3 Maio 2022, 16:15 • Maria da Glória Esquivel

O metabolismo secundário das plantas importância para a biotecnologia.

Metabolismo secundário deriva do primário. Breve resumo da via metabólicas mais importantes para a produção de terpenos, fenóis e alcaloides. Aspetos práticos de manipulação do meio de cultura e dos fatores ambientais para melhorar a produtividade de determinado metabolito secundário em células em suspensão.

Clonagem em E.coli

3 Maio 2022, 14:15 • Maria Luísa Lopes de Castro e Brito

Apresentação das etapas envolvidas numa estratégia de clonagem; hospedeiros de clonagem; vectores de clonagem: características gerais. Plasmídeos: pUC18 (a-complementação) e pBR322 (genes de resistência a dois antibióticos).

Métodos de transferência de genes em células microbianas:

- transformação e electroporação; competência natural e provocada, eficiência de transformação.

- transdução; ciclo lítico e ciclo lisogénico; utilização de bacteriófagos como vectores de clonagem.

- conjugação triparental; plasmídeos conjugativos (genes tra) e plasmídeos mobilizáveis (genes mob).

Selecção e Rastreio de recombinantes:

- Definições.

- Métodos de selecção e de rastreio: utilização de antibióticos;  inactivação por inserção;

complementação de mutações específicas.

 

Métodos de silenciamento génico e ediçao de genomas

26 Abril 2022, 16:15 • Maria Leonor Mota Morais Cecílio

Métodos baseados em endonucleases

ZincFinger

TALEN

Métodos baseados em RNA

RNA interferência 

CRISPR/Cas9

Vantagens da edição de genomas face a outro tipo de silenciamento

Vantagens e desvantagens dos diferentes métodos

Aplicações e perspetivas futuras

Transformação Genética de Plantas - Parte 2 - Análise fenotípica e molecular de Arabidopsis

26 Abril 2022, 16:15 • Ana Ana Isabel Faria Ribeiro

(1) Desenho experimental (estabelecido previamente a esta aula):
- Germinação e crescimento de duas linhas de Arabidopsis (8 semanas antes da aula)
- Implementação de stresse salino (substituição das regas com solução nutritiva por solução salina, 1 semana antes da aula)
(2) Consolidação da análise dos resultados da componente histoquímica (Aula prática - Parte 1)
(3) Observação e análise fenotípica das plantas sujeitas a stresse hídrico e respectivos controlos positivos
(4) Análise molecular (resultados de PCR)
(5) Integração de dados, identificação da linha transgénica e interpretação dos resultados e desvios
(6) Questionário

Transformação genética de plantas - Parte 2

26 Abril 2022, 14:15 • Ana Ana Isabel Faria Ribeiro

(1) Consolidação da Parte 1: conceitos, métodos de transformação genética de plantas e genes reporter

(2) Transformação genética em contexto fundamental:
- Estudos de desenvolvimento em Arabidopsis: sobre-expressão e silenciamento genético; análise e complementação de mutantes
- Complementação de mutantes
(3) Enquadramento da aula prática