Sumários

Clonagem em E. coli

9 Maio 2023, 16:15 • Maria Luísa Lopes de Castro e Brito

Utilização do plasmídeo pUC18 na clonagem de um gene heterólogo em Escherichia coli

Clonagem em E. coli

2 Maio 2023, 16:15 • Maria Luísa Lopes de Castro e Brito

Utilização do plasmídeo pUC18 na clonagem de um gene heterólogo em Escherichia coli

Clonagem de genes em bactérias

24 Abril 2023, 10:45 • Maria Luísa Lopes de Castro e Brito

Apresentação das etapas envolvidas numa estratégia de clonagem; hospedeiros de clonagem; vectores de clonagem: características gerais. Plasmídeos: pUC18 (a-complementação) e pBR322 (genes de resistência a dois antibióticos).

Métodos de transferência de genes em células microbianas:

- transformação e electroporação; competência natural e provocada, eficiência de transformação.

- transdução; ciclo lítico e ciclo lisogénico; utilização de bacteriófagos como vectores de clonagem.

- conjugação triparental; plasmídeos conjugativos (genes tra) e plasmídeos mobilizáveis (genes mob).

Selecção e Rastreio de recombinantes:

- Definições.

- Métodos de selecção e de rastreio: utilização de antibióticos; inactivação por inserção;

complementação de mutações específicas.

Análise integrada de transformantes

18 Abril 2023, 16:15 • Ana Ana Isabel Faria Ribeiro

Tolerância ao stresse salino em duas linhas de Arabidopsis thaliana

(1) Observação e anotação dos resultados da análise histoquímica do gene reporter GUS

(2) Observação e anotação dos resultados da análise fenotípica (tolerância vs. susceptibilidade ao sal)

(3) Análise dos resultados do PCR (presença/ausência do gene de resistência ao sal: AtS1P)

(4) Integração e interpretação de resultados

(5) Identificação da linha transgénica

Questionário de avaliação